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Lifesensors, 泛素和蛋白表达研究的先行者!           ★★★
Lifesensors, 泛素和蛋白表达研究的先行者!
作者:超级管理员 文章来源:本站原创 点击数:140 更新时间:2023-02-27

LifeSensors是一家为药物发现和研究市场提供方法和建立可行性技术的生物技术公司。该公司为泛素和泛素蛋白酶体通路研究提供创新性的研究工具而占据世界领导地位。其基于SUMOpro和SUMOstar的原核和真核蛋白表达系统以其卓越的性能已被世界范围内的学术、制药、生物技术公司和政府研究机构广泛应用。

1.  泛素研究领域

泛素,又称遍在蛋白质,几乎存在于所有的物种中,因而被冠之以“泛”。泛素由76个氨基酸残基组成,分子量约为8500Da.该蛋白高度保守,已发现的差别不超过两个氨基酸。以多蛋白质的形式被合成,在翻译后加工过程中,被切割成多个泛素分子。其主要功能为通过与蛋白质的赖氨酸残基连接,形成多聚泛素,导致被结合的蛋白质被细胞中 的蛋白酶体所识别并降解。

泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway, UPP)广泛存在于真核生物中,在维持细胞功能以及细胞周期运转,抵御环境胁迫,胚胎发育,激素响应和衰老等方面发挥着重要的作用,是细胞内蛋白质选择性降解的重要途径。在泛素化过程中对维持细胞内蛋白质的产生和降解的平衡及维持细胞的稳态和正常功能方面起着重要作用。

  

泛素分子(ubiquitin)主要通过泛素活化酶(E1)、泛素结合酶(E2)和泛素-蛋白连接酶(E3)与靶蛋白结合形成一条多泛素链,将底物蛋白泛素化,使靶蛋白被26S蛋白酶所识别和降解,这是一个需能、涉及三步酶促级联反应的过程。首先泛素的C-末端甘氨酸残基在一个ATP的参与下与E1的半胱氨酸残基间形成高能硫酯键;然后,E1把激活的泛素通过Ub-腺苷酸中间产物形成E2-Ub巯基酯;在E3的催化下,泛素的C-末端与蛋白底物的赖氨酸残基以一个酰胺异构肽腱连接,E2被释放;单个连接的泛素残基尚不足以引起底物降解,活细胞中有一系列的泛素残基可加到前一个泛素的第48位赖氨酸残基上,形成多聚泛素链(polyUb);最后,26S蛋白酶体的19S调节复合体识别、结合、展平泛素化的底物蛋白,然后由26S蛋白酶体的催化核心20S复合体最终将蛋白水解成含有3-22个氨基酸残基的多肽,而多聚泛素链在泛素再循环酶的作用下分解成单个泛素分子后释放出来并被重新利用,从而形成泛素-蛋白酶体途径的循环。 

LifeSensors为泛素研究领域提供最强大,最卓越的创新性研究工具,产品涉及去泛素化, 去泛素化分析试剂盒以及底物, 泛素亲和试剂, 泛素结合试剂和相关酶等。 

2.  蛋白表达领域

基于SUMO的蛋白(肽)表达系统可实现可溶的功能性蛋白在大肠杆菌,酵母,昆虫和哺乳动物细胞中产量最大化的表达。小类泛素修饰因子(small ubiquitinrelated modifier, SUMO)与泛素在氨基酸序列上虽然只有18%相同,但在二级和三级结构上有着惊人的相似。SUMO化(sumoylation)与泛素化(ubiquitination)的作用不同,它并不促使蛋白降解,反而是加强蛋白质的稳定性和调节蛋白在细胞内的定位和分布,以及影响蛋白的转录活性。

LifeSensors的SUMO-的表达系统利用了SUMO的独特功能,即SUMO以融合的分子伴侣的形式来1)促使蛋白质正确折叠,且以高度稳定的蛋白形式作为重组融合蛋白的附件显著提高目的蛋白的表达水平;2)SUMO折叠结构的内部疏水性和外部亲水性使融合蛋白的溶解性显著增加。而后,3)利用去SUMO酶可稳定有效且精准地切割SUMO的C-末端与目的蛋白的N-末端的连接处以移除SUMO标签,得到预期N-末端的目的蛋白,更能满足您的实验研究。

 

E.Coli表达系统: 发酵成本低,细胞密度高,可得到大量目的蛋白。SUMOpro, SUMOstar和SUMOpro3 三大卓越表达系统,可满足大部分研究需要;

Mammalian表达系统: 对接近于复杂天然结构的糖基化的生物治疗蛋白(抗体,生长因子和激素等)的表达,SUMOstar-哺乳动物细胞表达系统是最好的选择,适合于HEK293和CHO细胞瞬时转染研究和稳定细胞系构建;

Insect 表达系统: SUMOstar-昆虫细胞表达系统成功且广泛应用于许多顽固蛋白质的表达,如蛋白酪氨酸激酶等。SUMOstar可抵抗内源SUMO蛋白酶切割,极大地增加蛋白产量;

Yeast表达系统: 酵母发酵成本较低,细胞密度高,且可对蛋白进行翻译后修饰(二硫键的形成和糖基化等)。SUMOstar-可实现在酿酒酵母细胞中的表达和SUMOpro3-毕赤酵母中的胞外高量表达。


文章录入:超级管理员    责任编辑:超级管理员 
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